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miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)
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miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

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MR101-01/02
價  格:
700.00
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miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

microRNA 逆轉錄產品(莖環法)

優秀的線性關系:在寬廣的模板區間內具有良好的線性關系,可檢出低至pg 級RNA 模板

優越的反應體系:最適的Buffer 組分及濃度,更適用于microRNA 的逆轉錄

簡便的引物設計:提供配套的引物設計軟件,使得引物設計更加簡便

以小鼠肝臟組織Total RNA 的10 倍稀釋梯度(10 pg-1 μg) 為模板,使用miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop) (Vazyme #MR101) 進行逆轉錄,得到的cDNA 使用miRNA Universal SYBR ? qPCR Master Mix (Vazyme #MQ101)擴增mmu-miR-16 基因。結果顯示,在寬廣的模板區間內,該配套產品具有優秀的線性關系。

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop) 是適用于莖環法miRNA cDNA 一鏈合成的專用試劑盒,含基因組DNA 去除步驟,可以在42℃2 min 條件下快速去除基因組DNA 的污染,保證后續結果更加可靠。試劑盒基于的HiScript ? II Reverse Transcriptase 具有極高的熱穩定性,配以針對優化的緩沖體系,均有利于miRNA 特異性逆轉錄產物的生成。cDNA 產物后續定量,推薦使用本公司的miRNA Universal SYBR ? qPCR Master Mix (Vazyme # MQ101),以獲得最優的實驗結果。同時,配套推出miRNA逆轉錄莖環引物和定量引物的設計軟件,操作簡單,為miRNA 實驗保駕護航。

組分

MR101-01

(50 rxn / 20 μl reaction)

MR101-02

(100 rxn / 20 μl reaction)

RNase free dd2O

1 ml

1 ml

5 × gDNA Wiper Mix

100 μl

200 μl

10 × RT Mixa

100 μl

200 μl

HiScript II Enzyme Mix b

100 μl

200 μl

a. 包含dNTP。

b. 包含RNase inhibitor。

未找到相應參數組,請于后臺屬性模板中添加

Q1:MR101能否用于加polyA尾法逆轉錄?

A1:不能。MR101是通過莖環法逆轉miRNA,利用莖環引物在逆轉錄酶的作用下獲得cDNA。而加polyA尾法體系中含有兩個酶的作用,首先是polyA聚合酶在單鏈RNA的3’端加上一串polyA尾,然后利用體系中的Oligo dT通用型引物在逆轉錄酶的作用下進行逆轉錄反應。我們產品中沒有polyA聚合酶,故不能用于polyA尾法逆轉錄。

Q2:miRNA莖環引物如何設計?怎么配套使用MR101和MQ101?

A2:在諾唯贊公司官網-資源中心-實驗工具有一個Vazyme miRNA引物設計軟件,下載后打開,只需要把目的miRNA序列輸入到第一個框中,第二個框中所示為我們公司莖環序列,已經默認填在框里了,然后點擊“設計引物”,最大的框中出現的“逆轉錄引物序列”就是所需要合成的莖環引物序列,“PCR引物序列”就是后續做PCR或是熒光定量的上下游引物,其中下游引物是根據莖環序列設計的,所以能夠通用,MQ101試劑盒中的mQ Primer R就是通用的下游引物,所以如果采用MR101進行miRNA的逆轉,配套使用MQ101就無需合成定量的下游引物,可以直接采用試劑盒中的mQ Primer R。

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