mg冰球突破怎么出大奖
購物車中還沒有商品,趕緊選購吧!

產品訂購:[email protected]

技術支持:[email protected]

在線
客服

在線客服服務時間:8:30-17:30

客服
熱線

400-600-9335
客服服務熱線

關注
微信

諾唯贊生物

關注
微信

諾唯贊資訊

諾唯贊資訊

地 址:江蘇省南京經濟技術開發區科創路紅楓科技園C2棟   電話:400-600-9335    郵箱:[email protected]

版權所有-南京諾唯贊生物科技有限公司   備案號:蘇ICP備12014779號-1   友情鏈接:南京諾唯贊醫療科技有限公司

諾唯贊生物

南京諾唯贊生物科技有限公司

>
>
>
>
2 × Taq Master Mix for PAGE
瀏覽量:

2 × Taq Master Mix for PAGE

貨  號:
P113-01/02/03
價  格:
210.00
數  量
-
+
沒有此類產品
立即購買
加入購物車
產品詳情
FAQ
文獻引用
COA報告

 2 × Taq Master Mix for PAGE

產物適合于聚丙烯酰胺凝膠電泳的DNA聚合酶

優化的緩沖體系,便于快速得到理想的擴增結果

即用型的預混液,最大程度地減少實驗步驟

本產品由克隆有 Thermus aquaticus DNA Polymerase 基因的大腸桿菌表達并經過多步純化精制得到,不含核酸內切酶、核酸外切酶以及細菌DNA。Taq DNA Polymerase 具有5’ → 3’ 聚合酶活性和5’ → 3’ 外切酶活性,但無3’ → 5’ 外切酶活性。PCR 產物的3’ 端帶A,可克隆至T載體,并適用于ClonExpress? 快速克隆試劑盒(C112/C113/C115/C601)。本產品附帶的10 × Taq Buffer 經過特殊優化,PCR產物適合于聚丙烯酰胺凝膠電泳及瓊脂糖凝膠電泳。

組 分

P113-01

P113-02

P113-03

2 × Taq Master Mix for PAGE

5×1ml

15×1ml

50×1ml

-20℃保存。

 

未找到相應參數組,請于后臺屬性模板中添加

Q1:擴增效率低,實驗組無擴增條帶。

A1:(1) 引物

檢查人工合成的引物是否因存儲條件不當而降解;引物設計是否合理,可利用BLAST檢查引物特異性或重新設計引物。

(2) 模板

長期放置、反復凍融會導致模板斷裂、開環或降解,應使用新鮮制備的DNA雙鏈作為模板;模板GC含量過高會導致DNA的雙鏈無法打開,此時加入PCR Enhancer(貨號P021),可以有效降低解鏈溫度;模板的GC含量過低會導致擴增效率較差,可適當延長引物長度或通過梯度PCR摸索合適的反應條件;模板中存在抑制物,特別是甲醛固定及石蠟包埋的組織常含甲酸,會造成DNA脫嘌呤而影響PCR結果,建議稀釋使用或重新制備;若模板為cDNA,要確認逆轉錄所用RNA的純度及完整度。

(3) 酶

反應所用的酶因保存或運輸不當而失活,建議更換新酶或用另一來源的酶重新實驗。

(4) 擴增體系

反應體系配制錯誤,建議重復實驗。

(5) 反應程序

檢查變性溫度是否準確,PCR儀指示溫度與實際溫度是否相符。如果溫度過高,酶在前幾個循環就迅速失活;溫度過低則模板變性不徹底。可對退火溫度設置梯度,摸索最佳的退火溫度。檢測延伸時間是否充足。

(6) Mg2+濃度不合適

Mg2+濃度過低可影響PCR產量甚至使PCR擴增失敗;Mg2+濃度過高會降低PCR的特異性,應適當調整Mg2+濃度。

Q2:擴增的條帶亮度不太亮。

A2:(1) 引物

檢查人工合成的引物是否因存儲條件不當而降解。

(2) 模板

首先確認模板的質量,長期放置、反復凍融會導致模板斷裂、開環或降解,應使用新鮮制備的DNA雙鏈作為模板;如果模板沒有了,可用首次擴增產物按倍比稀釋后作為模板進行二次擴增。

(3) 酶

可適當提高酶的使用量。

(4) 反應程序

可嘗試使用Touch Down程序;延長延伸時間,提高循環數。

Q3:擴增特異性差,非特異性擴增。

A3:(1) 引物

引物設計不夠優化。引物與靶序列有非特異性互補或自身聚合成二聚體,可降低引物濃度進行優化,必要時重新設計引物。

(2) 模板

模板不純,被污染,需重新制備模板。

模板降解或過量,通過電泳檢查模板完整性及濃度,必要時重新純化模板。模板的使用量請參考說明書。

(3) 反應程序

反應程序不夠優化。如果出現比目的條帶小的雜帶,可通過提高退火溫度,降低循環數調整;如果出現比目的條帶大的雜帶,可縮短延伸時間、降低循環數。

(4) 酶

酶量加入過多。Taq系列:50μl體系加2U。

Q4:空白對照出現擴增產物。

A4:(1) 引物設計不合理

擴增序列與非目的擴增序列有同源性,PCR也可以擴增出非靶序列的序列。

(2) 若擴增產物條帶大小與目的條帶一致,說明有污染

更換新的Mix、水或引物重復實驗。反應體系在超凈工作臺內配制,減少氣溶膠污染。

(3) 為了避免靶序列受到整個基因組或大片段的交叉污染,操作時應小心輕柔,防止將靶序列吸入加樣槍內或濺出離心管外。

(4) 為了避免靶基因受到空氣中小片段核酸污染,可用巢式PCR方法減輕或消除污染。

暫未實現,敬請期待
暫未實現,敬請期待
貨  號
C301-01
貨  號
C601-01/02
貨  號
MD101-01/02
mg冰球突破怎么出大奖 足彩半全场怎么买 热门棋牌游戏 时时彩个位不连挂方案 pk104码2468技巧 江西时时从号事件 下载app送20元彩金集合 广东11选5走势 什么赛车游戏最好玩 云南时时网 澳洲快乐时时是真的吗 修改时间差玩时时彩 湖南手游棋牌代理