mg冰球突破怎么出大奖
購物車中還沒有商品,趕緊選購吧!

產品訂購:[email protected]

技術支持:[email protected]

在線
客服

在線客服服務時間:8:30-17:30

客服
熱線

400-600-9335
客服服務熱線

關注
微信

諾唯贊生物

關注
微信

諾唯贊資訊

諾唯贊資訊

地 址:江蘇省南京經濟技術開發區科創路紅楓科技園C2棟   電話:400-600-9335    郵箱:[email protected]

版權所有-南京諾唯贊生物科技有限公司   備案號:蘇ICP備12014779號-1   友情鏈接:南京諾唯贊醫療科技有限公司

諾唯贊生物

南京諾唯贊生物科技有限公司

瀏覽量:

T7 RNAi Transcription Kit

貨  號:
TR102-01/02
價  格:
1350.00
數  量
-
+
沒有此類產品
立即購買
加入購物車
產品詳情
FAQ
文獻引用
COA報告

T7 RNAi Transcription Kit

用于體外dsRNA 合成

可以轉錄siRNA和長片段dsRNA;

產量高達20-80 μg;

RNA磁珠可快速高效的純化轉錄產物

圖1.  500 bp dsRNA 2%瓊脂糖凝膠電泳圖

1:DL2000 Plus DNA Marker;2和4:500 bp dsRNA酶解前后產物(雙端轉);3和5:  500 bp dsRNA酶解前后產物(混合轉)。

圖2.  siRNA 12% PAGE電泳檢測結果

1:siRNA轉錄產物;2:siRNA轉錄雙酶消化產物;3:單鏈模板;4:雙鏈退火模板

圖3. siRNA干擾綠色熒光蛋白表達

左圖為GFP質粒與negative control GFP siRNA共轉染24 h后的293T細胞;右圖為GFP質粒和positive GFP siRNA共轉染24 h后的293T細胞。

T7 RNA ploymerase可識別帶有T7啟動子的DNA模版,以四種NTP 為底物,體外轉錄合成RNA。T7 RNAi Transcription Kit 是在T7 High Yield RNA Transcription Kit 基礎上為轉錄雙鏈RNA 而設計優化的版本,可用于轉錄21 bp 的siRNA 和長片段的dsRNA。轉錄產物經純化后可用于陽離子脂質體、磷酸鈣共沉淀、電穿孔、DEAE- 葡聚糖及顯微注射等方法介導的RNAi 實驗。一般情況下,一個反應可產生20 μg-80 μg 的RNA。

 

組分

TR102-01(25 rxn)

TR102-02(50 rxn)

Box 1

T7 Enzyme Mix

50 μl

100 μl

10 × Transcription Buffer

50 μl

100 μl

10 × Annealing Buffer

250 μl

500 μl

NTP Mix

200 μl

400 μl

DNase I

25 μl

50 μl

RNase T1(100 U/μl)

25 μl

50 μl

RNase T1 Dilution Buffer

300 μl

600 μl

Control Template*

5 μl

10 μl

Box 2

RNase-free H2O

5 ml

5 ml

RNA Clean Beads

2 ml

4 ml

* 本試劑盒提供的Control Template 為500 bp 雙端含T7 啟動子的PCR 產物,濃度為0.5 μg/μl。

Box 1 于-20℃保存,Box 2 于4℃保存。

未找到相應參數組,請于后臺屬性模板中添加

Q1:RNA產物片段大于預期

A1: 如果電泳顯示產物條帶大于預期,可能原因:①質粒模板可能沒有完全線性化;②有義鏈3’端為突出結構;③RNA存在未完全變性的二級結構。

建議確認模板結構,并將電泳方式由瓊脂糖膠換成變性膠來檢測RNA產物。

Q2:RNA產物片段小于預期

A2: 如果電泳顯示產物條帶小于預期大小,可能原因:①模板序列中包含類似于T7 RNA聚合酶的終止序列;②模板中GC含量高形成高級結構;③RNase污染。

不同的聚合酶識別不同的終止序列,若含是模板中含終止結構,建議嘗試不同的RNA聚合酶。如果模板為高GC,建議加入SSB蛋白,以提高轉錄效率。出現產物條帶與預期不一致,請跑變性膠檢測產物。

Q3:合成的模板長度為50bp,反應的時間是多久。

A3:建議使用4h,產量應該足夠。過夜也可,但產量不會多很多。

Q4: 產物電泳拖尾現象。

A4: 電泳過程中有拖尾現象,可能原因是模板投入量較多或者兩個模板不以1:1投入而導致模板或者單鏈RNA酶解不徹底,建議適當延長雙酶解時間。模板與單鏈RNA在總的轉錄產物中含量極低,一般不會影響后續實驗。

Q5:siRNA模板鏈設計。

A5:siRNA由于轉錄模板比較短,所以通常采用化學合成的方式得到四條單鏈DNA模板,再兩兩退火成轉錄模板。siRNA 3’端帶有兩個游離堿基,推薦在設計模板時在模板鏈3’端加兩個A堿基。siRNA的模板鏈包含:6個堿基的增強子、20個堿基的T7啟動子、19-21個堿基的目標序列及2個游離的T堿基。

暫未實現,敬請期待
暫未實現,敬請期待
貨  號
TR101-01/02
貨  號
EN301-01/02
貨  號
EN303-01/02
mg冰球突破怎么出大奖 上海时时杀码 北京pk赛车技巧 体育彩票26选55 赛车pk开奖走势图 幸运28开奖查询官网app 重庆时时开奖走势图 什么是秒速时时 公式法计算题10道 体彩贵州11选5开奖结果 内蒙古时时彩开奖结果走势图 开网上棋牌游戏合法吗 黑龙江时时彩开奖号码查询