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南京諾唯贊生物科技有限公司

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DNA Standard 1-6

貨  號:
NQ105
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2200.00
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DNA Standard 1-6

標準品試劑盒

包含絕對定量所有必須組分

新型染料法qPCR預混液VAHTSTM SYBR? qPCR Master Mix

擴增效率高、 GC含量兼容性好

標準品定量精準,批次間CV值<5%

精心優化的ROX染料濃度,提供ROX預混版本

兼容所有主流定量PCR儀

 

 

 

圖1. 使用VAHTSTM Library Quantification Kit for Illumina?繪制的標準曲線。

 

 

  本品是使用染料qPCR法進行Illumina?平臺高通量測序文庫濃度測定的專用試劑盒。其工作原理為使用標準品繪制標準曲線,再根據標準曲線計算待測文庫絕對濃度。試劑盒采用了一種基于抗體法熱啟動的新型染料法qPCR預混液VAHTSTM  SYBR? qPCR Master Mix。該預混液具有特異性高、擴增效率高、 GC含量適應性廣、檢測靈敏度高等諸多優勢,非常適合進行文庫濃度的絕對定量。 試劑盒中提供的所有試劑都經過了嚴格的質量控制,最大程度上保證了不同批次間實驗結果的可重復性。

包裝說明:

1. NQ101、NQ102、NQ103、NQ104為擴增組分試劑盒,包含VAHTS SYBR qPCR Master Mix、qPCR Primer Mix以及單獨包裝ROX (僅NQ101),包裝量足夠進行500次定量反應(20 μl reaction);NQ105為標準品試劑盒,包含DNA Standard 1-6,包裝量可用于8次標準曲線繪制(3孔重復);NQ106為文庫稀釋液試劑盒,包含50 ml Library Dilution Buffer。

2. 根據反應時ROX Reference Dye是否需要添加及需要添加的種類分類,主流定量PCR儀可分為以下三類:

NQ101試劑盒中提供單獨包裝的ROX Reference Dye 1/2,適用于所有定量PCR儀。使用時根據上表選擇適合的ROX Reference Dye;

NQ102試劑盒中無單獨包裝或預混ROX Reference Dye,適用于上表Type I 機型定量PCR儀;

NQ103試劑盒中的擴增預混液已預混Low ROX (ROX Reference Dye 2),適用于上表Type III 機型定量PCR儀;

NQ104試劑盒中的擴增預混液已預混High ROX (ROX Reference Dye 1),適用于上表Type II 機型定量PCR儀。

未找到相應參數組,請于后臺屬性模板中添加

Q1:DNA Standard 1 CT異常。

A1:(1)不恰當的基線設置會增大CT (DNA Standard 1)。手動調整基線為1-3循環。 

(2)儀器相關問題。確認所用ROX Reference Dye與定量儀器匹配。

Q2:文庫各稀釋度ΔCT與稀釋倍數差異不一致

A2:(1)移液精確度差。 所有試劑在使用前應充分解凍并徹底混勻。 

(2)文庫難于擴增。GC/AT含量過高或長度超過1 kb的文庫擴增效率較差,定量波動性大。 (3)文庫降解。文庫應現用現稀釋,稀釋好的文庫應置于冰上備用,用完丟棄。

Q3:DNA Standards有擴增,而文庫沒有或CT很大

A3:(1)文庫接頭序列錯誤:建議核對文庫末端序列與試劑盒提供的引物序列是否匹配。 

(2)稀釋度過高:建議減少稀釋倍數,重復實驗。 

(3)文庫降解:文庫應現用現稀釋,稀釋好的文庫應置于冰上備用,用完丟棄。

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貨  號
N411-01/02/03
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