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HiScript III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)
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HiScript III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

貨  號:
R312-01/02
價  格:
1250.00
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HiScript? III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

第三代高效cDNA 一鏈合成試劑盒(去基因組)

基于更高效的HiScript?III Reverse Transcriptase:逆轉錄效率高于二代產品

靈活選擇引物: 針對不同實驗設計可靈活使用不同類型的逆轉錄引物

gDNA wiper Mix可迅速徹底去除基因組污染:保證后續結果更加可靠,并可簡化qPCR引物設計,無需跨內含子設計引物

1.后續實驗為PCR

以1μg  HeLa細胞RNA為模板,按照R302說明書推薦體系進行逆轉錄,以1μl cDNA為模板,用2 ×Vazyme Lamp? Master Mix (Dye Plus)(Vazyme #P312)進行長片段擴增,將得到的產物進行瓊脂糖凝膠電泳,結果如圖1所示:擴增條帶單一且產量高

圖1.長片段擴增電泳圖

注:M:DL15000 Marker(Vazyme #MD103)

2.后續實驗為qPCR

以100 ng HeLa 細胞 RNA為模板,使用 HiScript? III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)(Vazyme #R312) 以及市售其他逆轉錄產品 (分別來自Supplier Ta、Th1、Th2、N、P、R、B、Tr、Ti),按照各自說明書推薦程序進行逆轉錄反應。將得到的 cDNA 進行多個基因的 qPCR定量分析。以不同公司產品為橫坐標,△CT (△CT = Vazyme #R312 cDNA擴增CT值–各公司逆轉錄產品 cDNA 擴增CT值)為縱坐標繪圖。從圖中可以看出,除一些體系Th1△CT>0外,其余公司逆轉錄產品均△CT<0,說明 Vazyme #R312逆轉錄效率優于Ta、Th2、N、P、R、B、Tr、Ti 相關逆轉錄產品。

HiScript? III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)是HiScript? II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)的升級版本,包含新一代逆轉錄酶HiScript? III Reverse Transcriptase和針對逆轉錄優化的最適Buffer,進一步提高了一鏈合成的效率。該試劑盒中的5 × gDNAwiper Mix可在42℃,2 min條件下快速去除基因組DNA污染,保證后續結果更加可靠,并可簡化qPCR引物設計,無需跨內含子設計引物。試劑盒中包含單組分逆轉錄引物Oligo (dT)20VN和Random hexamers,用戶可根據需要,靈活選擇逆轉錄引物進行后續實驗。本試劑盒既可合成用于克隆等下游實驗的全長cDNA (可達20 kb),亦可合成高度均一的用于qPCR定量的cDNA。

組分

R312-01 (50 rxn)

R312-02 (100 rxn)

RNase-free ddH2O

1 ml

1 ml

5 × gDNA wiper Mix

100 μl

200 μl

10 × RT Mixa

100 μl

200 μl

HiScript?III Enzyme Mixb

100 μl

200 μl

Oligo (dT) 20VN

50 μl

100 μl

Random hexamers

50 μl

100 μl

a. 包含dNTP

b. 包含RNase inhibitor

- 30℃~- 15℃保存

未找到相應參數組,請于后臺屬性模板中添加

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