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Bacteria RNA Extraction Kit

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R403-01
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440.00
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Bacteria RNA Extraction Kit

原核生物總RNA 提取試劑

針對原核生物(革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌)及真菌(非孢子)總RNA 提取而定向優化

前處理液與基于異硫氰酸胍酚的裂解液連用,大幅度提高RNA 產量和純度

操作簡便,省時,無需溶菌酶或超聲處理

 

 

使用Bacteria RNA Plus Reagent配合RNA  Isolater Total RNA Extraction Reagent(Vazyme #401)提取大腸桿菌DH5α總RNA。M:DL15000 DNA Marker(Vazyme #MD103)。A:1x108菌量,100 ul Bacteria RNA Plus Reagent預處理。B:5x107菌量,100 ul Bacteria RNA Plus Reagent預處理。C:5x107菌量,100 ul DEPC水預處理。D:5x107菌量,不做預處理。以上洗脫體積均為25 ul,上樣量1 ul。

Bacteria RNA Extraction Kit 是針對從細菌(革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌)中分離總RNA 的簡便,穩定的方法。試劑盒由Bacteria RNA Plus Reagent (Vazyme #R402)和RNA isolater Total RNA Extraction Reagent(Vazyme #R401)組成。Bacteria RNA Plus Reagent >(Vazyme #R402)含有優化的緩沖體系,螯合劑及蛋白變性劑等成分,能夠高效抑制細菌內源RNase,同時使蛋白質變性。RNA isolater Total RNA Extraction Reagent(Vazyme #R401)總RNA 提取試劑基于異硫氰酸胍和酚,具有極強的裂解能力,可在短時間內裂解樣本,即時保護RNA 的完整性。二者連用,可以從細菌中高效地提取總RNA,保證產量和質量的最大化。提取的總RNA 適用于Real-time PCR (qPCR), RT-PCR, Northern Blotting 等下游實驗。本試劑也適用于酵母等真菌RNA 提取。

組分

R403-01  (100 rxn)

Bacteria RNA Plus Reagent

20 ml

RNA isolater Total RNA Extraction Reagent

100 ml

RNA Isolater Total RNA Extraction Reagent 4℃避光保存;

Bacteria RNA Plus Reagent室溫存放,如果試劑在存放過程中產生沉淀析出,請于65℃加熱片刻溶解并混勻。

未找到相應參數組,請于后臺屬性模板中添加

Q1:RNA產量偏低。

A1:使用Bacteria RNA Extraction Kit提取原核生物RNA達不到預期產量,可能原因有:(1) 裂解不夠完全或起始菌量低于要求起始量,可適當增加起始菌量,或延長處理時間到5 min;(2) RNA沉淀未完全溶解,可在60℃加熱5 min充分溶解RNA。

Q2:RNA降解。

A2:使用Bacteria RNA Extraction Kit高溫處理細菌數分鐘不會引起RNA降解,加入RNA isolater Total RNA Extraction Reagent(Vazyme #R401)后可與游離出來的RNA充分接觸,保護 RNA不受降解。分離出水相后的處理過程如果存在RNase則可能引起降解,因此請務必在實驗整體過程中使用RNase-free的槍頭及離心管,使用DEPC處理過的水配制試劑及溶解RNA,保證操作區域的清潔,減少RNA降解的可能。某些原核細菌如枯草桿菌內源性RNase含量較高,難以完全滅活,如果發現產物有部分降解,可適量降低起始菌量,使用200 μl處理液,嚴格按照標準操作流程進行實驗,全程保持低溫操作,并以熟練的操作手法盡量縮短不必要的操作時長。

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