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HiScript II Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)
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HiScript II Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

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R223-01
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1350.00
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HiScript? II Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)

預混液形式的兩步法RT-qPCR 首選試劑(去基因組)

基于高效的HiScript? II Reverse Transcriptase,逆轉錄效率更高

Anchored Oligo (dT) 23  VN 設計獨特,確保反應特異性,提高第一鏈cDNA 合成效率和成功率

即用型的SuperMix 預混液使用方便省時

gDNA wiper Mix 可迅速徹底去除基因組污染

 

以HeLa 細胞RNA 為模板,使用Vazyme #R223 和Supplier Ta、Supplier Tg 同類產品,在各自說明書所提供的反應體系及反應條件下進行逆轉錄,然后用qPCR 檢測基因ACTB 和CBR3。結果表明與同類產品相比,Vazyme #R223 在擴增效率和擴增線性上表現都較優異。

本產品是以高性價比的HiScript? II Reverse Transcriptase 為基礎的兩步法qPCR 試劑盒。試劑盒中的4 × gDNA wiper Mix 可徹底去除殘留的基因組DNA 污染,保證后續定量結果更加可靠。5 × HiScript?II qRT SuperMix II 中含有逆轉錄反應所需的所有組分,加入模板RNA 和水即可迅速進行反應,同時終止gDNA wiper 作用,保證cDNA 的完整性。本產品針對qPCR 進行特別優化,逆轉錄產物兼容SYBR Green 和探針法qPCR,可以根據實驗目的,選擇相應的試劑配合使用,進行高性能的基因表達分析。

組分

R223-01 100 rxn (20 μl/rxn)

RNase free ddH2O

2×1 ml  

4 × gDNA wiper Mix

400 μl

5 × HiScript? II qRT SuperMix II a

400 μl

5 × No RT Control Mix b

40 μl

a.   包含Buffer、dNTP、HiScript? II Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、Random primers/Oligo (dT)23VN primer mix。

注意:與HiScript? II Q RT SuperMix  for qPCR (R222-01)中所帶的5 ×HiScript? II qRT SuperMix成分不同,不可以混用。

b.  除不含HiScript? II Reverse Transcriptase外,其余成分與5 ×HiScript? II qRT SuperMix II相同,用于配制No RT對照反應,排除基因組殘留。

未找到相應參數組,請于后臺屬性模板中添加

Q1:原核生物RNA能用我們的逆轉錄試劑嗎?

A1:可以。原核生物RNA沒有polyA尾,所以在逆轉錄反應體系中需要以Random primer作為逆轉錄引物。

Q2:逆轉錄試劑盒中帶有gDNA wiper Mix,可以去除殘留在RNA中的基因組。最多可以去除多少的基因組?但如果不進行基因組去除,會影響接下來的逆轉錄嗎?

A2:我們做過100ng基因組的測試,去除效率是99.95%。如果不進行基因組去除不會影響逆轉錄實驗的進行,但是如果基因組殘留嚴重但不去除的話,會影響接下來定量實驗的準確性。

Q3:延長逆轉錄時間,是否可以提高逆轉錄效率?

A3:對于大多數基因,延長逆轉錄時間對逆轉錄效率并沒有顯著提升;對于一些GC含量較高或含高級結構的模板,延長逆轉錄時間可提升逆轉錄效率。

Q4:做了No RT Control發現有gDNA殘留怎么辦?

A4:如果使用試劑盒中的gDNA wiper模塊進行gDNA去除,但No RT Control仍有CT值,可通過實驗組和No RT Control組的CT值來判斷實驗數據是否可用。當實驗組CT值與No RT Control對照組CT值差值大于5,說明由gDNA導致的誤差小于5%,則可以忽略gDNA污染;若實驗組與對照組CT值差值小于3或者幾乎一致,則實驗組擴增產物的模板很大一部分來源于gDNA,這樣的實驗組就失去定量意義。

Q5:如何評判RNA質量?

A5:RNA質量從兩個方面反應:

(1) RNA完整度。通過瓊脂糖凝膠電泳驗證RNA完整度。以真核生物為例,完整的總RNA有清晰的三條帶,分子量從大到小分別為28S、18S、5S,并且28S是18S亮度的兩倍;若能看見三條帶,但帶型模糊或彌散,則說明RNA有部分降解,此時請立即進行逆轉錄反應,并適量加大模板量;若只能看見分子量很小的一條帶或沒有條帶,則 RNA 已完全降解,需要重新提取。

(2) RNA的純度。RNA的純度可以通過OD260/280和OD260/230兩個比值是否在1.8-2.1范圍內進行判斷,蛋白、離子等殘留會使比值降低。

Q6:如何選擇逆轉錄的引物?

A6:根據實驗的具體情況選擇隨機引物、Oligo dT或基因特異性引物進行逆轉錄。

(1) 隨機引物:隨機結合在RNA的任何區域,適用于rRNA、mRNA、tRNA等所有RNA類型的逆轉錄反應。

(2) Oligo dT:適用于具有PolyA尾的RNA(原核生物RNA、真核生物的rRNA和tRNA不具有PolyA尾)。 由于Oligo dT結合在PolyA尾上,所以對 RNA 樣品的質量要求較高,即使有少量的降解也會使全長cDNA合成量大大減少。

(3) 基因特異性引物:與模板序列互補,適用于序列已知的基因逆轉錄。

cDNA后續進行PCR擴增長片段,一般用Oligo dT或者基因特異性引物,不建議使用隨機引物,因為隨機引物是隨機結合的,cDNA片段會偏短,可能會對長片段擴增造成稀釋,后續擴增不出全長的目的基因;cDNA后續進行qPCR,一般使用Oligo dT和隨機引物的混合物,可以避免3’端和5’端的擴增偏好性。

Q7:可以通過測逆轉產物cDNA濃度判定逆轉效率嗎?

A7:不可以,逆轉錄產物cDNA是混合物,除了cDNA產物以外,還有buffer、逆轉錄酶、引物,同時還包含未轉錄的模板RNA,總RNA中的tRNA、rRNA等,都會干擾濃度測定結果,因此不能反應真實的cDNA產量。

Zhou H, Liu J, Zhou C, et al. In vivo simultaneous transcriptional activation of multiple genes in the brain using CRISPR-dCas9-activator transgenic mice.[J]. Nature Neuroscience, 2018.IF17.839

Guo M, Li C, Lei Y, et al. (2016). Role of the adipose PPARγ-adiponectin axis in susceptibility to stress and depression/anxiety-related behaviors.Mol Psychiatry.IF:13.3

Yang L, Wang W H, Qiu W L, et al. A single-cell transcriptomic analysis reveals precise pathways and regulatory mechanisms underlying hepatoblast differentiation.[J]. Hepatology, 2017, 66(5):1387.IF13.246

Wang Y, Tang Z, Huang H, et al. Pulmonary alveolar type I cell population consists of two distinct subtypes that differ in cell fate[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2018, 115(10):2407.IF9.661

Jin S, Tian S, Chen Y, et al. (2016). USP19 modulates autophagy and antiviral immune responses by deubiquitinating Beclin-1. The EMBO Journal, 35(8):866-880. IF:9.643

Li J, Wang Z, Chu Q, et al. The Strength of Mechanical Forces Determines the Differentiation of Alveolar Epithelial Cells.[J]. Developmental Cell, 2018, 44(3):297.IF9.174

Liu T, Tang Q, Liu K, et al. (2016). TRIM11 Suppresses AIM2 Inflammasome by Degrading AIM2 via p62-Dependent Selective Autophagy.[J]. Cell Reports, 16(7):1988. IF:7.87

Chai Q, Shang X, Wu S, et al. (2017). 5-aminolevulinic acid dehydratase gene dosage affects programmed cell death and immunity[J]. Plant Physiology, 2017:pp.00816.2017.IF:6.456

Hui W, Huo X, Yang X R, et al.(2017).  STAT3-mediated upregulation of lncRNA HOXD-AS1 as a ceRNA facilitates liver cancer metastasis by regulating SOX4[J]. Molecular Cancer, 2017, 16(1):136. IF:6.204

Ni M, Ma W, Wang X, et al. (2017). Next generation transgenic cotton pyramiding RNAi and Bt counters insect resistance.[J]. Plant Biotechnology Journal,.IF:6.09

Zhang Y, Du J, Zheng J, et al. (2015). EGF-reduced Wnt5a transcription induces epithelial-mesenchymal transition via Arf6-ERK signaling in gastric cancercells. Oncotarget, 6(9):7244-7261. IF:6.627

Hu W, Zhu L, Yang X, et al. (2016). The epidermal growth factor receptor regulates cofilin activity and promotes transmissible gastroenteritis virus entry intointestinal epithelial cells. Oncotarget, 7(11):12206-12221. IF:6.359

Han YC, Kuang JF, Chen JY, et al. (2016). Banana Transcription Factor MaERF11 Recruits Histone Deacetylase MaHDA1 and Represses the Expression of MaACO1 and Expansins during Fruit Ripening. Plant Physiol, 171(2):1070-1084. IF:6.28

Shi S, Wang T, Chen Z, et al. (2016). OsHAC1;1 and OsHAC1;2 Function as Arsenate Reductases and Regulate Arsenic Accumulation. Plant Physiol, 172(3), 1708-1719. IF:6.28

Chen J, Fan X, Qian K, et al.(2017).pOsNAR2.1:OsNAR2.1 expression enhances nitrogen uptake efficiency and grain yield in transgenic rice plants.[J]. Plant Biotechnology Journal, IF:6.09

Niu YF, Wang X, Hu DX, et al. (2016). Molecular characterization of a glycerol-3-phosphate acyltransferase reveals key features essential for triacylglycerolproduction in Phaeodactylumtricornutum. Biotechnology for Biofuels, 9:60. IF:6.044

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